Katayuan ng availability: | |
---|---|
Detection Kit para sa Avian Influenza Virus H5/H7/H9/General Subtype RNA(PCR-Fluorescence Probing)
【Pangalan ng Produkto】
Real-Time PCR Detection Kit para sa Avian Influenza Virus H5/H7/H9/General Subtype
【Package】
50 kits/kahon
【Mga pangunahing bahagi at nilalaman】
Pangalan | Pagtutukoy | Dami |
H5/H7/H9/General Trivalent Reaction Solution | 1250µl/Tube | 1 |
H5/H7/H9/Pangkalahatang Positibong Kontrol | 250µl/Tube | 1 |
Negatibong Kontrol | 250µl/Tube | 1 |
【Storage at Shelf Life】
Naka-imbak sa -20±5 ℃, Paulit-ulit na pagyeyelo at lasaw ≤ 3 beses, ang buhay ng istante ay 12 buwan.
【Modelo】
ABI 7500, ABI QuantStudio 5, CFX Connect, CFX Opus 96, LightCycler480, Gentiter 96E/96R, LineGene 9600 Plus at iba pang fluorescent quantitative PCR amplifier.
【Paraan ng Pagsubok】
1. Pagkuha ng Nucleic Acid
Maaaring isagawa ang commercialized RNA extraction kit para sa nucleic acid extraction, mangyaring sundin ang tagubilin ng kit.
2. Pagpapalakas ng PCR
2.1 Kalkulahin ang bilang ng mga sample ng pagsubok, kumuha ng n+2 PCR reaction tubes, at magdagdag ng 25µl sa reaction solution sa bawat tubo.
2.2 Magdagdag ng 5µl nucleic acid ng negatibong kontrol, positibong kontrol at mga sample sa itaas na PCR reaction tubes ayon sa pagkakabanggit, centrifuge sa 8000rpm para sa ilang segundo, at ilagay ang mga ito sa fluorescent quantitative PCR amplifier..
2.3 Ang mga kondisyon ng reaksyon ay itinakda tulad ng sumusunod:
Mga nauugnay na parameter ng amplifier | |||
Sistema | Kabuuang dami: 30µl | ||
Pagkolekta ng signal
| Avian Influenza H5/H7/H9/General
| H5 subtype - Kinokolekta ng HEX channel ang fluorescence signal | |
H7 subtype - Kinokolekta ng FAM channel ang fluorescence signal | |||
H9 subtype - Kinokolekta ng channel ng Cy5 ang fluorescence signal | |||
Pangkalahatan - Kinokolekta ng ROX channel ang fluorescence signal | |||
Mga kondisyon ng reaksyon ng PCR
| Yugto | Condition | Numero ng cycle |
Baliktad na Transkripsyon | 55℃: 15 minuto | 1 | |
Predegeneration | 95 ℃: 30 segundo | 1 | |
PCR
| 95 ℃: 10 segundo |
40
| |
56 ℃: 30 segundo (Itakda upang mangolekta ng fluorescent signal sa dulo ng yugtong ito) |
【Interpretasyon ng mga resulta】
1. Pagpapasiya ng pagiging epektibo ng test kit :
(1) Mahinang positibong kontrol: Ct value ng FAM, HEX, Cy5 at ROX channel ≤ 32, amplification curve na may halatang exponential phase.
(2) Blangkong kontrol: Ang FAM, HEX, Cy5 at ROX channel ay walang amplification curve, o ang amplification curve ay tuwid o bahagyang pahilig, walang makabuluhang exponential phase, at Ct value ≥ 38 o walang Ct value.
2. Pagpapasiya ng mga resulta:
Resulta ng Paghuhukom | FAM channel | HEX channel | Cy5 channel | ROX channel |
Avian influenza virus H5 subtype nucleic acid positibo | - | + | - | + |
Avian influenza virus H7 subtype nucleic acid positibo | + | - | - | + |
Avian influenza virus H9 subtype nucleic acid positibo | - | - | + | + |
Avian influenza virus H5/H7 nucleic subtype acid positibo | + | + | - | + |
Avian influenza virus H5/H9 nucleic subtype acid positibo | - | + | + | + |
Avian influenza virus H7/H9 nucleic subtype acid positibo | + | - | + | + |
Avian influenza virus H5/H7/H9 nucleic subtype acid positibo | + | + | + | + |
Mababang pathogenic avian influenza virus nucleic acid positibo | - | - | - | + |
Negatibo ang avian influenza virus nucleic acid | - | - | - | - |
*Tandaan:
(1) Kung mayroong logarithmic growth phase amplification curve at Ct value ≤ 36, ito ay hinuhusgahan bilang +.Kung walang amplification curve o Ct value > 36, ito ay judge bilang -.Ang mga sample ay kahina-hinala kapag 36 < Ct value <40, na kailangang muling suriin.
(2) Kung ang mga resulta ng anumang H5/H7/H9 subtype ay + na may ROX channel -, kailangan itong muling suriin.
【Mga pag-iingat】
1. Ang pamamahala sa laboratoryo ay dapat na mahigpit na naaayon sa mga detalye ng pamamahala ng laboratoryo ng PCR gene amplification.Ang mga tauhan ng laboratoryo ay dapat na sanay na propesyonal.Ang proseso ng eksperimento ay dapat isagawa nang mahigpit sa iba't ibang lugar (Lugar ng paghahanda ng reagent, lugar ng paghahanda ng ispesimen, lugar ng amplification at pagsusuri ng produkto).Ang lahat ng mga consumable ay dapat itapon pagkatapos ng isterilisasyon.Ang mga espesyal na kagamitan, kagamitan at mga supply sa bawat yugto ng operasyon ng eksperimento ay hindi dapat gamitin sa cross-use.
2. Mangyaring ihanda ang biological safety cabinet para sa reagent at yugto ng paghahanda ng ispesimen.Ang Lab coat, disposable gloves at pipettor ay dapat isagawa sa panahon ng eksperimento.
3. Ang paulit-ulit na pagyeyelo at lasaw ng mga reagents ay dapat iwasan hangga't maaari.Bago gamitin, ang mga reagents ay dapat na ganap na lasawin at i-centrifuge sa 8000rpm sa loob ng ilang segundo.
4. Mangyaring ilagay ang pipette na ginamit sa lugar ng paghahanda ng ispesimen sa lalagyan na naglalaman ng disinfectant at itapon kasama ng basura pagkatapos ng isterilisasyon.
5. Pagkatapos ng eksperimento, ang worktable at pipettor ay ginagamot ng 10% hypochlorite o 75% alcohol o ultraviolet lamp.
【Paggawa】
Pangalan: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Isang subsidiary ng Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Address: Building B2, Bandaohuigu Industrial Park, Shungeng Road, Zhucheng City, Shandong Province
Post Code: 262233
Telepono: +86 - 0532 5882 0810
Detection Kit para sa Avian Influenza Virus H5/H7/H9/General Subtype RNA(PCR-Fluorescence Probing)
【Pangalan ng Produkto】
Real-Time PCR Detection Kit para sa Avian Influenza Virus H5/H7/H9/General Subtype
【Package】
50 kits/kahon
【Mga pangunahing bahagi at nilalaman】
Pangalan | Pagtutukoy | Dami |
H5/H7/H9/General Trivalent Reaction Solution | 1250µl/Tube | 1 |
H5/H7/H9/Pangkalahatang Positibong Kontrol | 250µl/Tube | 1 |
Negatibong Kontrol | 250µl/Tube | 1 |
【Storage at Shelf Life】
Naka-imbak sa -20±5 ℃, Paulit-ulit na pagyeyelo at lasaw ≤ 3 beses, ang buhay ng istante ay 12 buwan.
【Modelo】
ABI 7500, ABI QuantStudio 5, CFX Connect, CFX Opus 96, LightCycler480, Gentiter 96E/96R, LineGene 9600 Plus at iba pang fluorescent quantitative PCR amplifier.
【Paraan ng Pagsubok】
1. Pagkuha ng Nucleic Acid
Maaaring isagawa ang commercialized RNA extraction kit para sa nucleic acid extraction, mangyaring sundin ang tagubilin ng kit.
2. Pagpapalakas ng PCR
2.1 Kalkulahin ang bilang ng mga sample ng pagsubok, kumuha ng n+2 PCR reaction tubes, at magdagdag ng 25µl sa reaction solution sa bawat tubo.
2.2 Magdagdag ng 5µl nucleic acid ng negatibong kontrol, positibong kontrol at mga sample sa itaas na PCR reaction tubes ayon sa pagkakabanggit, centrifuge sa 8000rpm para sa ilang segundo, at ilagay ang mga ito sa fluorescent quantitative PCR amplifier..
2.3 Ang mga kondisyon ng reaksyon ay itinakda tulad ng sumusunod:
Mga nauugnay na parameter ng amplifier | |||
Sistema | Kabuuang dami: 30µl | ||
Pagkolekta ng signal
| Avian Influenza H5/H7/H9/General
| H5 subtype - Kinokolekta ng HEX channel ang fluorescence signal | |
H7 subtype - Kinokolekta ng FAM channel ang fluorescence signal | |||
H9 subtype - Kinokolekta ng channel ng Cy5 ang fluorescence signal | |||
Pangkalahatan - Kinokolekta ng ROX channel ang fluorescence signal | |||
Mga kondisyon ng reaksyon ng PCR
| Yugto | Condition | Numero ng cycle |
Baliktad na Transkripsyon | 55℃: 15 minuto | 1 | |
Predegeneration | 95 ℃: 30 segundo | 1 | |
PCR
| 95 ℃: 10 segundo |
40
| |
56 ℃: 30 segundo (Itakda upang mangolekta ng fluorescent signal sa dulo ng yugtong ito) |
【Interpretasyon ng mga resulta】
1. Pagpapasiya ng pagiging epektibo ng test kit :
(1) Mahinang positibong kontrol: Ct value ng FAM, HEX, Cy5 at ROX channel ≤ 32, amplification curve na may halatang exponential phase.
(2) Blangkong kontrol: Ang FAM, HEX, Cy5 at ROX channel ay walang amplification curve, o ang amplification curve ay tuwid o bahagyang pahilig, walang makabuluhang exponential phase, at Ct value ≥ 38 o walang Ct value.
2. Pagpapasiya ng mga resulta:
Resulta ng Paghuhukom | FAM channel | HEX channel | Cy5 channel | ROX channel |
Avian influenza virus H5 subtype nucleic acid positibo | - | + | - | + |
Avian influenza virus H7 subtype nucleic acid positibo | + | - | - | + |
Avian influenza virus H9 subtype nucleic acid positibo | - | - | + | + |
Avian influenza virus H5/H7 nucleic subtype acid positibo | + | + | - | + |
Avian influenza virus H5/H9 nucleic subtype acid positibo | - | + | + | + |
Avian influenza virus H7/H9 nucleic subtype acid positibo | + | - | + | + |
Avian influenza virus H5/H7/H9 nucleic subtype acid positibo | + | + | + | + |
Mababang pathogenic avian influenza virus nucleic acid positibo | - | - | - | + |
Negatibo ang avian influenza virus nucleic acid | - | - | - | - |
*Tandaan:
(1) Kung mayroong logarithmic growth phase amplification curve at Ct value ≤ 36, ito ay hinuhusgahan bilang +.Kung walang amplification curve o Ct value > 36, ito ay judge bilang -.Ang mga sample ay kahina-hinala kapag 36 < Ct value <40, na kailangang muling suriin.
(2) Kung ang mga resulta ng anumang H5/H7/H9 subtype ay + na may ROX channel -, kailangan itong muling suriin.
【Mga pag-iingat】
1. Ang pamamahala sa laboratoryo ay dapat na mahigpit na naaayon sa mga detalye ng pamamahala ng laboratoryo ng PCR gene amplification.Ang mga tauhan ng laboratoryo ay dapat na sanay na propesyonal.Ang proseso ng eksperimento ay dapat isagawa nang mahigpit sa iba't ibang lugar (Lugar ng paghahanda ng reagent, lugar ng paghahanda ng ispesimen, lugar ng amplification at pagsusuri ng produkto).Ang lahat ng mga consumable ay dapat itapon pagkatapos ng isterilisasyon.Ang mga espesyal na kagamitan, kagamitan at mga supply sa bawat yugto ng operasyon ng eksperimento ay hindi dapat gamitin sa cross-use.
2. Mangyaring ihanda ang biological safety cabinet para sa reagent at yugto ng paghahanda ng ispesimen.Ang Lab coat, disposable gloves at pipettor ay dapat isagawa sa panahon ng eksperimento.
3. Ang paulit-ulit na pagyeyelo at lasaw ng mga reagents ay dapat iwasan hangga't maaari.Bago gamitin, ang mga reagents ay dapat na ganap na lasawin at i-centrifuge sa 8000rpm sa loob ng ilang segundo.
4. Mangyaring ilagay ang pipette na ginamit sa lugar ng paghahanda ng ispesimen sa lalagyan na naglalaman ng disinfectant at itapon kasama ng basura pagkatapos ng isterilisasyon.
5. Pagkatapos ng eksperimento, ang worktable at pipettor ay ginagamot ng 10% hypochlorite o 75% alcohol o ultraviolet lamp.
【Paggawa】
Pangalan: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Isang subsidiary ng Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Address: Building B2, Bandaohuigu Industrial Park, Shungeng Road, Zhucheng City, Shandong Province
Post Code: 262233
Telepono: +86 - 0532 5882 0810