 |
Real-time na PCR Detection Kit para sa Mycoplasma Bovis
【Pangalan ng Produkto】Real-time na PCR Detection Kit para sa Mycoplasma Bovis
【Pakete】50 Pagsusulit
【Indikasyon】Ang Real-time na PCR Detection Kit para sa Mycoplasma Bovis ay naaangkop upang makita ang Mycoplasma Bovis RNA sa nasal swab, gatas, joint fluid sample.Ang mga resulta ng pagsusulit ay para sa layunin ng pananaliksik lamang at hindi para sa klinikal na diagnosis.
【Mga pangunahing bahagi at nilalaman】
Pangalan | Pagtutukoy | Dami |
Solusyon sa Reaksyon ng MB | 1150µl/Tube | 1 |
MB Positibong Kontrol | 100µl/Tube | 1 |
Negatibong Kontrol | 100µl/Tube | 1 |
【Storage at Shelf Life】
Naka-imbak sa -20±5 ℃, Paulit-ulit na pagyeyelo at lasaw ≤ 3 beses, ang buhay ng istante ay 12 buwan.
【Paraan ng Pagsubok】
1. Pagkuha ng Nucleic Acid
Maaaring isagawa ang commercialized RNA extraction kit para sa nucleic acid extraction, mangyaring sundin ang tagubilin ng kit.
2. PCR amplification (Halimbawa ng ABI 7500, sumangguni sa operasyong ito at manual para sa ABI 7300 at LC480.)
2.1 Kalkulahin ang bilang ng mga sample ng pagsubok, kumuha ng n+2 PCR reaction tubes, at magdagdag ng 20µl to ng reaksyong solusyon sa bawat tubo.
2.2 Magdagdag ng 5µl nucleic acid ng negatibong kontrol, positibong kontrol, at mga sample sa itaas na mga tubo ng reaksyon ng PRC ayon sa pagkakabanggit, centrifuge sa 8000rpm sa loob ng ilang segundo, at ilagay ang mga ito sa fluorescent quantitative PCR amplifier.
3. qRT-PCR amplification
3.1 Fluorescence signal channel: Ang probe detection mode ay nakatakda bilang: Reporter Dye1: FAM, at Quencher Dye:WALA.
3.2 Ang mga kondisyon ng reaksyon ay dapat itakda bilang:
Mga parameter ng amplification | |||
Sistema | Ang kabuuang volume ay 25µl | ||
Mga Kondisyon ng Reaksyon ng PCR | Phase | Mga kundisyon | Mga cycle |
Proseso ng UNG | 37 ℃ sa loob ng 2 minuto | 1 | |
Pre-denaturation | 95 ℃ sa loob ng 30 segundo | 1 | |
PCR | 95 ℃ sa loob ng 10 segundo |
40 | |
60 ℃ sa loob ng 30 segundo Itakda upang kolektahin ang fluorescent signal sa pagtatapos ng yugtong ito | |||
【Interpretasyon ng mga resulta】
1. Ang validity judgement:
1.1 Positibong Kontrol: Ang Ct value ng FAM channel ≤ 32, at ang amplification curve ay may makabuluhang exponential growth phase.
1.2 Negatibong Kontrol: Ang FAM channel ay walang amplification curve, o ang amplification curve ay straight line o slight oblique line.
2. Ang paghatol sa resulta ng pagsusulit:
Kung mayroon ang FAM detection channel ng test sample walang amplification curve, maaari itong matukoy bilang MB negatibo.
Kung ang FAM detection channel ay may exponential growing amplification curve at ang Ct value ay ≤ 36, maaari itong matukoy bilang MB positive.
36 ang mga sample ay dapat isaalang-alang bilang kaduda-dudang resulta, at dapat na ulitin ang pagsusuri para sa kumpirmasyon.
【Mga pag-iingat】
1. Ang pamamahala sa laboratoryo ay dapat na mahigpit na naaayon sa mga detalye ng pamamahala ng laboratoryo ng PCR gene amplification.Ang mga tauhan ng laboratoryo ay dapat na sanay na propesyonal.Ang proseso ng eksperimento ay dapat isagawa nang mahigpit sa iba't ibang lugar (Lugar ng paghahanda ng reagent, lugar ng paghahanda ng ispesimen, lugar ng amplification at pagsusuri ng produkto).Lahat ng mga consumable ay dapat itapon pagkatapos ng isterilisasyon.Ang mga espesyal na kagamitan, kagamitan at mga supply sa bawat yugto ng operasyon ng eksperimento ay hindi dapat gamitin sa cross-use.
2. Mangyaring ihanda ang biological safety cabinet para sa reagent at yugto ng paghahanda ng ispesimen.Ang Lab coat, disposable gloves at pipettor ay dapat isagawa sa panahon ng eksperimento.
3. Ang paulit-ulit na pagyeyelo at lasaw ng mga reagents ay dapat iwasan hangga't maaari.Bago gamitin, ang mga reagents ay dapat na ganap na lasawin at i-centrifuge sa 8000rpm sa loob ng ilang segundo.
4. Mangyaring ilagay ang pipette na ginamit sa lugar ng paghahanda ng ispesimen sa lalagyan na naglalaman ng disinfectant at itapon kasama ng basura pagkatapos ng isterilisasyon.
5. Pagkatapos ng eksperimento, ang worktable at pipettor ay dapat tratuhin ng 10% hypochlorite o 75% alcohol o ultraviolet lamp.
【Paggawa】
Pangalan: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Isang subsidiary ng Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Address: Building B2, Bandaohuigu Industrial Park, Shungeng Road, Zhucheng City, Shandong Province
Post Code: 262233
Telepono: +86 - 0532 5882 0810
Real-time na PCR Detection Kit para sa Mycoplasma Bovis
【Pangalan ng Produkto】Real-time na PCR Detection Kit para sa Mycoplasma Bovis
【Pakete】50 Pagsusulit
【Indikasyon】Ang Real-time na PCR Detection Kit para sa Mycoplasma Bovis ay naaangkop upang makita ang Mycoplasma Bovis RNA sa nasal swab, gatas, joint fluid sample.Ang mga resulta ng pagsusulit ay para sa layunin ng pananaliksik lamang at hindi para sa klinikal na diagnosis.
【Mga pangunahing bahagi at nilalaman】
Pangalan | Pagtutukoy | Dami |
Solusyon sa Reaksyon ng MB | 1150µl/Tube | 1 |
MB Positibong Kontrol | 100µl/Tube | 1 |
Negatibong Kontrol | 100µl/Tube | 1 |
【Storage at Shelf Life】
Naka-imbak sa -20±5 ℃, Paulit-ulit na pagyeyelo at lasaw ≤ 3 beses, ang buhay ng istante ay 12 buwan.
【Paraan ng Pagsubok】
1. Pagkuha ng Nucleic Acid
Maaaring isagawa ang commercialized RNA extraction kit para sa nucleic acid extraction, mangyaring sundin ang tagubilin ng kit.
2. PCR amplification (Halimbawa ng ABI 7500, sumangguni sa operasyong ito at manual para sa ABI 7300 at LC480.)
2.1 Kalkulahin ang bilang ng mga sample ng pagsubok, kumuha ng n+2 PCR reaction tubes, at magdagdag ng 20µl to ng reaksyong solusyon sa bawat tubo.
2.2 Magdagdag ng 5µl nucleic acid ng negatibong kontrol, positibong kontrol, at mga sample sa itaas na mga tubo ng reaksyon ng PRC ayon sa pagkakabanggit, centrifuge sa 8000rpm sa loob ng ilang segundo, at ilagay ang mga ito sa fluorescent quantitative PCR amplifier.
3. qRT-PCR amplification
3.1 Fluorescence signal channel: Ang probe detection mode ay nakatakda bilang: Reporter Dye1: FAM, at Quencher Dye:WALA.
3.2 Ang mga kondisyon ng reaksyon ay dapat itakda bilang:
Mga parameter ng amplification | |||
Sistema | Ang kabuuang volume ay 25µl | ||
Mga Kondisyon ng Reaksyon ng PCR | Phase | Mga kundisyon | Mga cycle |
Proseso ng UNG | 37 ℃ sa loob ng 2 minuto | 1 | |
Pre-denaturation | 95 ℃ sa loob ng 30 segundo | 1 | |
PCR | 95 ℃ sa loob ng 10 segundo |
40 | |
60 ℃ sa loob ng 30 segundo Itakda upang kolektahin ang fluorescent signal sa pagtatapos ng yugtong ito | |||
【Interpretasyon ng mga resulta】
1. Ang validity judgement:
1.1 Positibong Kontrol: Ang Ct value ng FAM channel ≤ 32, at ang amplification curve ay may makabuluhang exponential growth phase.
1.2 Negatibong Kontrol: Ang FAM channel ay walang amplification curve, o ang amplification curve ay straight line o slight oblique line.
2. Ang paghatol sa resulta ng pagsusulit:
Kung mayroon ang FAM detection channel ng test sample walang amplification curve, maaari itong matukoy bilang MB negatibo.
Kung ang FAM detection channel ay may exponential growing amplification curve at ang Ct value ay ≤ 36, maaari itong matukoy bilang MB positive.
36 ang mga sample ay dapat isaalang-alang bilang kaduda-dudang resulta, at dapat na ulitin ang pagsusuri para sa kumpirmasyon.
【Mga pag-iingat】
1. Ang pamamahala sa laboratoryo ay dapat na mahigpit na naaayon sa mga detalye ng pamamahala ng laboratoryo ng PCR gene amplification.Ang mga tauhan ng laboratoryo ay dapat na sanay na propesyonal.Ang proseso ng eksperimento ay dapat isagawa nang mahigpit sa iba't ibang lugar (Lugar ng paghahanda ng reagent, lugar ng paghahanda ng ispesimen, lugar ng amplification at pagsusuri ng produkto).Lahat ng mga consumable ay dapat itapon pagkatapos ng isterilisasyon.Ang mga espesyal na kagamitan, kagamitan at mga supply sa bawat yugto ng operasyon ng eksperimento ay hindi dapat gamitin sa cross-use.
2. Mangyaring ihanda ang biological safety cabinet para sa reagent at yugto ng paghahanda ng ispesimen.Ang Lab coat, disposable gloves at pipettor ay dapat isagawa sa panahon ng eksperimento.
3. Ang paulit-ulit na pagyeyelo at lasaw ng mga reagents ay dapat iwasan hangga't maaari.Bago gamitin, ang mga reagents ay dapat na ganap na lasawin at i-centrifuge sa 8000rpm sa loob ng ilang segundo.
4. Mangyaring ilagay ang pipette na ginamit sa lugar ng paghahanda ng ispesimen sa lalagyan na naglalaman ng disinfectant at itapon kasama ng basura pagkatapos ng isterilisasyon.
5. Pagkatapos ng eksperimento, ang worktable at pipettor ay dapat tratuhin ng 10% hypochlorite o 75% alcohol o ultraviolet lamp.
【Paggawa】
Pangalan: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Isang subsidiary ng Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Address: Building B2, Bandaohuigu Industrial Park, Shungeng Road, Zhucheng City, Shandong Province
Post Code: 262233
Telepono: +86 - 0532 5882 0810
