 |
Real-time na PCR Detection Kit para sa Mycoplasma Synoviae
【Pangalan ng Produkto】Real-time na PCR Detection Kit para sa Mycoplasma Synoviae (MS)
【Package】50 kits/kahon
【Indikasyon】Ang Real-time na PCR Detection Kit para sa Mycoplasma Synoviae ay naaangkop upang makita ang Mycoplasma Synoviae DNA sa avian respiratory sample, lung tissue at iba pang sample.Ang mga resulta ng pagsusulit ay para sa layunin ng pananaliksik lamang at hindi para sa klinikal na diagnosis.
【Mga pangunahing bahagi at nilalaman】
Pangalan | Pagtutukoy | Dami |
MS Double Reaction Solution | 900µl/Tube | 1 |
MS Double Positibong Kontrol | 100µl/Tube | 1 |
Negatibong Kontrol | 100µl/Tube | 1 |
【Storage at Shelf Life】
Naka-imbak sa -20±5 ℃, Paulit-ulit na pagyeyelo at lasaw ≤ 3 beses, ang buhay ng istante ay 12 buwan.
【Teorya】
Ang kit na ito ay batay sa Real-Time Fluorescent PCR Technology. Pinipili nito ang ligaw na virus ng Mycoplasma Synoviaes at ang conserved region ng vaccine strain na MS-H bilang mga target na rehiyon ng amplification, nagdidisenyo ng mga partikular na primer probe at nagmamarka ng iba't ibang fluorescent group, at nagsasagawa ng qualitative pagtuklas ng Mycoplasma Synoviae sa pamamagitan ng isang hakbang na Real-Time fluorescent PCR system amplification. Bilang karagdagan sa mga partikular na primer at fluorescent probes, ang reaction system ay nilagyan din ng kaukulang PCR Buffer, Taq enzyme.dNTPs, Mg2+ at iba pang mga bahagi, na maaaring makamit ang sensitibo at tiyak na pagtuklas ng MS nucleic acid, at tukuyin ang ligaw na virus at strain ng bakuna na MS-H.
【Instrumento】ABI 7500, ABI 7300, LightCycler480 o iba pang parehong fluorescent quantitative PCR instruments.
【Sample na Kinakailangan】
Mga sample ng paghinga at mga sample ng baga.
【Paraan ng Pagsubok】
1. Pagkuha ng Nucleic Acid
Maaaring isagawa ang commercialized DNA extraction kit para sa nucleic acid extraction, mangyaring sundin ang instruksyon ng kit.
2. Pagpapalakas ng PCR
2.1 Kalkulahin ang bilang ng mga sample ng pagsubok, kumuha ng n+2 PCR reaction tubes, at magdagdag ng 18µl sa reaction solution sa bawat tubo.
2.2 Magdagdag ng 2µl nucleic acid ng negatibong kontrol, positibong kontrol at mga sample ng nucleic acid sa itaas na mga tubo ng reaksyon ng PRC ayon sa pagkakabanggit, centrifuge sa 8000rpm sa loob ng ilang segundo, at ilagay ang mga ito sa fluorescent quantitative PCR amplifier.
3. qR-T-PCR amplification
3.1 Pagpili ng Fluorescence channel
Reporter Dye1: piliin ang FAM channel para makita ang MS-H vaccine strain, Quencher Dye: WALA
Reporter Dye2: piliin ang VIC o HEX channel para makita ang MS wild virus strain, Quencher Dye2: WALA, passive reference: WALA.Sumangguni sa manwal ng instrumento para sa iba pang mga instrumento.
3.2 Ang mga kondisyon ng reaksyon ay itinakda bilang:
Mga parameter ng amplification | |||
Sistema | Ang kabuuang volume ay 25µl | ||
Kondisyon ng Reaksyon ng PCR | Phase | Mga kundisyon | Mga cycle |
Pre-denaturation | 95 ℃ sa loob ng 5 minuto | 1 | |
PCR | 95 ℃ sa loob ng 10 segundo |
40 | |
60 ℃ sa loob ng 30 segundo | |||
【Interpretasyon ng mga resulta】
1. Ang mga sumusunod na kinakailangan ay dapat itugma sa parehong oras sa isang eksperimento, kung hindi, ang eksperimento ay hindi wasto at kailangang ulitin.
Ang negatibong kontrol ay walang amplification curve
Ang amplification curve ng positive control FAM channel ay may makabuluhang logarithmic growth phase, at ang Ct value ng FAM channel amplification curve ay ≤ 32.
2. Kung ang FAM channel ng test sample ay walang amplification curve, ang sample ay maaaring matukoy bilang IBDV negative.Kung ang FAM channel ay may logarithmic growth phase amplification curve at ang Ct value na ≤ 36, na maaaring matukoy bilang IBDV positive.Ang 36 < Ct value < 40 ay mga kahina-hinalang sample, na kailangang muling suriin para sa kumpirmasyon.
【Mga pag-iingat】
1. Ang pamamahala sa laboratoryo ay dapat na mahigpit na naaayon sa mga detalye ng pamamahala ng laboratoryo ng PCR gene amplification.Ang mga tauhan ng laboratoryo ay dapat na sanay na propesyonal.Ang proseso ng eksperimento ay dapat isagawa nang mahigpit sa iba't ibang lugar (Lugar ng paghahanda ng reagent, lugar ng paghahanda ng ispesimen, lugar ng amplification at pagsusuri ng produkto).Lahat ng mga consumable ay dapat itapon pagkatapos ng isterilisasyon.Ang mga espesyal na kagamitan, kagamitan at mga supply sa bawat yugto ng operasyon ng eksperimento ay hindi dapat gamitin sa cross-use.
2. Mangyaring ihanda ang biological safety cabinet para sa reagent at yugto ng paghahanda ng ispesimen.Ang Lab coat, disposable gloves at pipettor ay dapat isagawa sa panahon ng eksperimento.
3. Ang paulit-ulit na pagyeyelo at lasaw ng mga reagents ay dapat iwasan hangga't maaari.Bago gamitin, ang mga reagents ay dapat na ganap na lasawin at i-centrifuge sa 8000rpm sa loob ng ilang segundo.
4. Mangyaring ilagay ang pipette na ginamit sa lugar ng paghahanda ng ispesimen sa lalagyan na naglalaman ng disinfectant at itapon kasama ng basura pagkatapos ng isterilisasyon.
5. Pagkatapos ng eksperimento, ang worktable at pipettor ay ginagamot ng 10% hypochlorite o 75% alcohol o ultraviolet lamp.
【Paggawa】
Pangalan: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Isang subsidiary ng Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Address: Building B2, Bandaohuigu Industrial Park, Shungeng Road, Zhucheng City, Shandong Province
Post Code: 262233
Telepono: +86 - 0532 5882 0810
Real-time na PCR Detection Kit para sa Mycoplasma Synoviae
【Pangalan ng Produkto】Real-time na PCR Detection Kit para sa Mycoplasma Synoviae (MS)
【Package】50 kits/kahon
【Indikasyon】Ang Real-time na PCR Detection Kit para sa Mycoplasma Synoviae ay naaangkop upang makita ang Mycoplasma Synoviae DNA sa avian respiratory sample, lung tissue at iba pang sample.Ang mga resulta ng pagsusulit ay para sa layunin ng pananaliksik lamang at hindi para sa klinikal na diagnosis.
【Mga pangunahing bahagi at nilalaman】
Pangalan | Pagtutukoy | Dami |
MS Double Reaction Solution | 900µl/Tube | 1 |
MS Double Positibong Kontrol | 100µl/Tube | 1 |
Negatibong Kontrol | 100µl/Tube | 1 |
【Storage at Shelf Life】
Naka-imbak sa -20±5 ℃, Paulit-ulit na pagyeyelo at lasaw ≤ 3 beses, ang buhay ng istante ay 12 buwan.
【Teorya】
Ang kit na ito ay batay sa Real-Time Fluorescent PCR Technology. Pinipili nito ang ligaw na virus ng Mycoplasma Synoviaes at ang conserved region ng vaccine strain na MS-H bilang mga target na rehiyon ng amplification, nagdidisenyo ng mga partikular na primer probe at nagmamarka ng iba't ibang fluorescent group, at nagsasagawa ng qualitative pagtuklas ng Mycoplasma Synoviae sa pamamagitan ng isang hakbang na Real-Time fluorescent PCR system amplification. Bilang karagdagan sa mga partikular na primer at fluorescent probes, ang reaction system ay nilagyan din ng kaukulang PCR Buffer, Taq enzyme.dNTPs, Mg2+ at iba pang mga bahagi, na maaaring makamit ang sensitibo at tiyak na pagtuklas ng MS nucleic acid, at tukuyin ang ligaw na virus at strain ng bakuna na MS-H.
【Instrumento】ABI 7500, ABI 7300, LightCycler480 o iba pang parehong fluorescent quantitative PCR instruments.
【Sample na Kinakailangan】
Mga sample ng paghinga at mga sample ng baga.
【Paraan ng Pagsubok】
1. Pagkuha ng Nucleic Acid
Maaaring isagawa ang commercialized DNA extraction kit para sa nucleic acid extraction, mangyaring sundin ang instruksyon ng kit.
2. Pagpapalakas ng PCR
2.1 Kalkulahin ang bilang ng mga sample ng pagsubok, kumuha ng n+2 PCR reaction tubes, at magdagdag ng 18µl sa reaction solution sa bawat tubo.
2.2 Magdagdag ng 2µl nucleic acid ng negatibong kontrol, positibong kontrol at mga sample ng nucleic acid sa itaas na mga tubo ng reaksyon ng PRC ayon sa pagkakabanggit, centrifuge sa 8000rpm sa loob ng ilang segundo, at ilagay ang mga ito sa fluorescent quantitative PCR amplifier.
3. qR-T-PCR amplification
3.1 Pagpili ng Fluorescence channel
Reporter Dye1: piliin ang FAM channel para makita ang MS-H vaccine strain, Quencher Dye: WALA
Reporter Dye2: piliin ang VIC o HEX channel para makita ang MS wild virus strain, Quencher Dye2: WALA, passive reference: WALA.Sumangguni sa manwal ng instrumento para sa iba pang mga instrumento.
3.2 Ang mga kondisyon ng reaksyon ay itinakda bilang:
Mga parameter ng amplification | |||
Sistema | Ang kabuuang volume ay 25µl | ||
Kondisyon ng Reaksyon ng PCR | Phase | Mga kundisyon | Mga cycle |
Pre-denaturation | 95 ℃ sa loob ng 5 minuto | 1 | |
PCR | 95 ℃ sa loob ng 10 segundo |
40 | |
60 ℃ sa loob ng 30 segundo | |||
【Interpretasyon ng mga resulta】
1. Ang mga sumusunod na kinakailangan ay dapat itugma sa parehong oras sa isang eksperimento, kung hindi, ang eksperimento ay hindi wasto at kailangang ulitin.
Ang negatibong kontrol ay walang amplification curve
Ang amplification curve ng positive control FAM channel ay may makabuluhang logarithmic growth phase, at ang Ct value ng FAM channel amplification curve ay ≤ 32.
2. Kung ang FAM channel ng test sample ay walang amplification curve, ang sample ay maaaring matukoy bilang IBDV negative.Kung ang FAM channel ay may logarithmic growth phase amplification curve at ang Ct value na ≤ 36, na maaaring matukoy bilang IBDV positive.Ang 36 < Ct value < 40 ay mga kahina-hinalang sample, na kailangang muling suriin para sa kumpirmasyon.
【Mga pag-iingat】
1. Ang pamamahala sa laboratoryo ay dapat na mahigpit na naaayon sa mga detalye ng pamamahala ng laboratoryo ng PCR gene amplification.Ang mga tauhan ng laboratoryo ay dapat na sanay na propesyonal.Ang proseso ng eksperimento ay dapat isagawa nang mahigpit sa iba't ibang lugar (Lugar ng paghahanda ng reagent, lugar ng paghahanda ng ispesimen, lugar ng amplification at pagsusuri ng produkto).Lahat ng mga consumable ay dapat itapon pagkatapos ng isterilisasyon.Ang mga espesyal na kagamitan, kagamitan at mga supply sa bawat yugto ng operasyon ng eksperimento ay hindi dapat gamitin sa cross-use.
2. Mangyaring ihanda ang biological safety cabinet para sa reagent at yugto ng paghahanda ng ispesimen.Ang Lab coat, disposable gloves at pipettor ay dapat isagawa sa panahon ng eksperimento.
3. Ang paulit-ulit na pagyeyelo at lasaw ng mga reagents ay dapat iwasan hangga't maaari.Bago gamitin, ang mga reagents ay dapat na ganap na lasawin at i-centrifuge sa 8000rpm sa loob ng ilang segundo.
4. Mangyaring ilagay ang pipette na ginamit sa lugar ng paghahanda ng ispesimen sa lalagyan na naglalaman ng disinfectant at itapon kasama ng basura pagkatapos ng isterilisasyon.
5. Pagkatapos ng eksperimento, ang worktable at pipettor ay ginagamot ng 10% hypochlorite o 75% alcohol o ultraviolet lamp.
【Paggawa】
Pangalan: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Isang subsidiary ng Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Address: Building B2, Bandaohuigu Industrial Park, Shungeng Road, Zhucheng City, Shandong Province
Post Code: 262233
Telepono: +86 - 0532 5882 0810
